培养基如何制备？培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质的。关于培养基如何制备以及培养基如何制备，培养基的制备方法，培养基的制备流程，培养基制备流程，培养基的一般制备流程等问题，子健常识将为你整理以下的日常知识：

培养基如何制备

　　培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。

　　一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。

　　培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。

　　培养基由于富含营养物质，易被污染或变质。

　　制备培养基的步骤：1.配料配方换算→在容器中加入少量水（蒸馏水，自然水）→按照配方称取各种药品（依次加入）→加足所需水量（一药一勺，取药后立即盖上瓶盖）。

　　2.溶解淀粉溶解：少量冷水调成糊状加热溶解，特别是加有琼脂的培养基，一定要煮沸，琼脂的熔解温度95-97℃ ，且需要边加热边搅拌以防止烧焦。

　　3.调PH用1N的盐酸或1N的 NaOH把培养基调节到所要求的值。

　　4.过滤滤纸或棉花进行过滤。

　　（有时可以省去）5.分装一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。

　　(1)三角瓶若作静置培养，则100ml培养基/250ml的三角瓶，最多不能超过150ml培养基/250ml的。

　　(2)试管分装液体培养基一般装4-5ml，约试管的1/4高度；固体斜面培养基一般装3-4ml，约试管的1/5高度。

　　6.包扎分装好后，塞上棉塞，在用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。

　　7.灭菌按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。

　　如果灭菌的温度太高，营养成分会被破坏，培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。

　　8.摆斜面灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放，使其凝固成为一个斜面，约占试管长度的1/2。

　　9.贮存培养基在30℃下放置一天，无污染的即可使用。

　　一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用

配制培养基的步骤？

　　1、配制溶液

　　向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解，最后补足所需水分。

　　对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。

　　配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至完全融化。

　　并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。

　　2、调节pH值

　　用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。

　　3、过滤

　　用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。

　　用纱布过滤时，最好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。

　　4、分装

　　已过滤的培养基应进行分装。

　　如果要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。

　　如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。

　　分装时，一手捏松弹簧夹，使培养基流出，另一只手握住几支试管或锥形瓶，依次接取培养基。

　　分装时，注意不要使培养基粘附管口或瓶口，以免浸湿棉塞引起杂菌污染。

　　装入试管的培养基量，视试管和锥形瓶的大小及需要而定。

　　一般制作斜面培养基时，每只15×150毫米的试管，约装3～4毫升（1/4～1/3试管高度），如制作深层培养基，每只20×220毫米的试管约装12～15毫升。

　　每只锥形瓶装入的培养基，一般以其容积的一半为宜。

　　5、加棉塞

　　分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。

　　堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。

　　棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。

　　制作棉塞时，要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度，揪取手掌心大小一块，铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中，用右手食指插入棉花中部，同时左手食指与姆指稍稍紧握，就会形成1个长棒形的棉塞。

　　棉塞作成后，应迅速塞入管口或瓶口中，棉塞应紧贴内壁不留缝隙，以防空气中微生物沿皱折侵入。

　　棉塞不要过紧过松，塞好后，以手提棉塞、管、瓶不下落为合适。

　　棉塞的2/3应在管内或瓶内，上端露出少许棉花便于拔取。

　　塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札，准备灭菌。

　　6、制作斜面培养基和平板培养基

　　培养基灭菌后，如制作斜面培养基和平板培养基，须趁培养基未凝固时进行。

　　(1)制作斜面培养基。

　　在实验台上放1支长0.5～1米左右的木条，厚度为1厘米左右。

　　将试管头部枕在木条上，使管内培养基自然倾斜，凝固后即成斜面培养基。

　　(2)制作平板培养基。

　　将刚刚灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台上，点燃酒精灯，右手托起锥形瓶瓶底，左手拔下棉塞，将瓶口在酒精灯上稍加灼烧，左手打开培养皿盖，右手迅速将培养基倒入培养皿中，每皿约倒入10毫升，以铺满皿底为度。

　　铺放培养基后放置15分钟左右，待培养基凝固后，再5个培养皿一叠，倒置过来，平放在恒温箱里，24小时后检查，如培养基未长杂菌，即可用来培养微生物。

　　参考资料来源：百度百科—培养基